Ubicació i contacte

Actualment es troba situat a la primera planta de l'edifici Cientificotècnic. El seu responsable es Guillem Ramis.

Tècnica

El microscopi confocal és un microscopi òptic que té 2 diafragmes:

• Un diafragma d'il·luminació de mida invariable col·locat darrera la font de llum.
• Un diafragma de mida variable situat davant del fotodetector, la utilitat del qual   és eliminar la llum emesa per la mostra localitzada fora del pla focal, que permet l'obtenció de seccions òptiques més o menys grosses, propietat única del microscopi confocal.

Aquestes “seccions òptiques” són combinació del diàmetre del diafragma de detecció, l'apertura numèrica de l'objectiu i la longitud d'ona utilitzada.

El feix del làser és dirigit a un punt concret del pla focal. La llum reflectida per la mostra, o la fluorescència emesa, és dirigida i captada per un fotodetector, una vegada travessa el diafragma. La imatge focal s'obté després de rastrejar la mostra (scanning) amb el làser. Les imatges obtingudes són sempre imatges digitals: els fotodetectors (PMTs) transformen el senyal lumínic en un senyal elèctric, que mitjançant el sistema informàtic acoblat, es tradueix en un píxel. Cada píxel proporciona informació referent a la localització tridimensional del punt excitat, així com la intensitat lumínica d'aquest punt.

Equipament

El microscopi làser confocal que disposa els SCT disposa de:

Microscopis òptics de fluorescència

• Microscopi òptic de fluorescència Leica microsystems DMRB.
• Microscopi òptic de fluorescència invertit Leica microsystems DMIRB, per a anàlisi de microscòpia de contrast de fase, camp clar i fluorescència i equipat amb pletina per a la observació de plaques de cultiu i anàlisi de cèl·lules vives.
• Objectius:
  • Leica N PLAN 5x/0.12 PH 0
  • Leica N PLAN 10x/0.25 PH 1
  • Leica N PLAN L 20x/0.40 PH 1
  • Leica N PLAN L 40x/0.55 PH 2
  • Leica N PLAN L 40x/0.65
  • Leica PL FLUOTAR L 63x/0.70 PH2
  • Leica N PLAN 100x/1.25 OIL
• Càmera CCD ultra-ràpida d’alta sensibilitat per a l’adquisició d’imatges , Leica microsystems DFC-360FX amb software d’anàlisi d’imatges LAS AF. 

Microscopi Confocal Espectral de Barrido Làser

Microscopi Confocal Espectral de Barrido Làser (CLSM) d’alta resolució Leica microsystems TCS SPE amb làsers d’estat sòlid de 405, 488, 532 i 635 nm (dispositius làser classe 3B/IIIb), amb software LAS X.

• Objectius
  • Leica ACS APO 10x/0.3 CS
  • Leica HC PL FLUOTAR 10x/0.30
  • Leica ACS APO 40x/1.15 OIL CS
  • Leica ACS APO 40x/1.25-0.75 OIL CS
  • Leica ACS APO 63x/1.30 OIL CS
  • Leica HCX PL APO 63x/1.40-0.60 OIL CS
  • Leica HCX PL APO 100x/1.40-0.70 OIL CS
• Equip per a l’anàlisi de cèl·lules In Vivo equipat amb cambra d’incubació termostatitzada i control de la saturació de CO2.

Aplicacions

Són nombroses principalment en el camp de la biologia i amb la particularitat que permet fer observacions “in vivo”:

• Identificar i localitzar components moleculars específics.
• Estudis de disposició de proteïnes i altre tipus de molècules.
• Transport intracel·lular
• Mesura de concentracions d'ions intracel·lulars
• Desenvolupament i expressió genètica
• Hibridació in situ amb sondes fluorescents

Obtenció d’imatges de fluorescència i llum transmesa, multicanal, multidimensional.

• Microscòpia de cèl·lula viva.
• Anàlisi de proximitat i dinàmica molecular. Co-localització
• Manteniment de línies cel·lulars per experiments de microscòpia
• Immunocitoquímica i Histocitoquímica: Marcatges cel·lulars i moleculars (transfeccions, tincions), tant en cèl·lules animals com vegetals, així com en microorganismes.
• Observació de mostres de materials en camp clar i fluorescència, en mode epifluorescència i confocal.
• Anàlisi d’imatges:
• Processat (filtrat, reconstruccions 3D, muntatge vídeos) i anàlisi d’imatges (Co-localització, dinàmica molecular, anàlisi de partícules i superfícies).
• Assessorament en el disseny, preparació, realització i anàlisi d’experiments de tècniques de microscòpia òptica.

En el camp de ciència de materials s'aplica en la observació de la morfologia dels defectes de sòlids com components microelectrònics, polímers, resines, dipòsits minerals, ceràmiques metalls, etc.

 - Projecció 3D de cèl·lules en cultiu sobre un implant metàl·lic de Titani, Alumini i Vanadi. Marcatge: Nuclis (Blau) i Citoesquelet d’actina (verd).
Llopis-Grimalt, M.A.;Arbós, A.; Gil-Mir, M.; Mosur, A.; Kulkarni, P.; Salito, A.; Ramis, J.M.; Monjo, M. Multifunctional properties of quercitrin coated Porous Ti-6Al-4V implants for orthopaedic applications assessed in vitro. (2020) Journal of Clinical Medicine 9 (3): 855. doi: 10.3390/jcm9030855.-

 - Imatge de bacteris Halothece sp.PCC 7418 crescudes en limitació de nutrients. Marcatge: Àcids Nucleics (Blau), Autofluorescència i Imatge realitzada amb llum transmesa-

  - Marcatge diferencial d’un cultiu primari. Marcatge: Nuclis (Blau), Neurones (Verd) i Cèl·lules Glials (Roig)-